<menu id="qosos"><table id="qosos"></table></menu>
  • <rt id="qosos"><u id="qosos"></u></rt>
    <bdo id="qosos"><center id="qosos"></center></bdo>
  • <xmp id="qosos"><table id="qosos"></table>
  • ?

    生鮮食品中五種食源性病原微生物多重PCR檢測技術的建立.doc

    資料分類:農業大學 上傳會員:翩翩起舞 更新時間:2022-05-10
    需要金幣2000 個金幣 資料包括:完整論文 下載論文
    轉換比率:金額 X 10=金幣數量, 例100元=1000金幣 論文字數:16241
    折扣與優惠:團購最低可5折優惠 - 了解詳情 論文格式:Word格式(*.doc)

    摘要:建立一種快速、經濟、實用的多重 PCR方法 ,能同時檢測 5種常見致病菌。根據利用針對,鼠傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157:H7、單核細胞增生李斯特菌和副溶血性弧菌毒力基因,分別設計5對引物并進行特異性、敏感性試驗以及優化反應體系 ,建立了快速檢測針對鼠傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157:H7、單核細胞增生李斯特菌和副溶血性弧菌的多重 PCR 方法,最終的反應體系的終濃度:1×PCR buffer,MgCl2為2.0mM,dNTPs為0.15mM,exTaq酶為2.0U,鼠傷寒沙門氏菌、大腸桿菌O157:H7、副溶血性弧菌、單增李斯特菌、金黃色葡萄球菌上下游引物濃度分別為:0.8μM、0.4μM、0.6μM、0.8μM、1.0μM,每種菌模板添加量為1μL,加ddH2O補足50μL。95℃預變性3min;94℃變性30s;59℃復性30s;72℃延伸30s,經過32個循環;72℃后延伸10min。 

    初步建立能快速、靈敏、特異地檢測針對鼠傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157:H7、單核細胞增生李斯特菌和副溶血性弧菌的多重 PCR體系 ,可以作為食物病原菌檢測的有效方法。

     

    關鍵詞:多重 PCR;食源性病原微生物;生鮮食品

     

    目錄

    摘要

    Abstract

    1 前言-1

    1.1 食源性致病菌與食品安全-1

    1.2 食源性病原微生物-1

    1.2.1沙門氏菌-1

    1.2.2大腸桿菌O157:H7-2

    1.2.3金黃色葡萄球菌-3

    1.2.4副溶血弧菌-4

    1.2.5 單核細胞增生李斯特氏菌-4

    1.3.1食源性致病菌的傳統檢測方法-5

    1.3.2 常規PCR技術-5

    1.3.3 DNA探針雜交技術-5

    1.3.4 多重PCR(multiplex PCR)-5

    2 本實驗的目的和意義-8

    3 材料與方法-8

    3.1 材料與試劑-8

    3.1.1 菌株-8

    3.1.2 主要試劑-9

    3.1.3 儀器設備-9

    3.2 實驗方法-9

    3.2.1 細菌的培養和模板的制備-9

    3.2.2 引物設計-9

    3.2.3 多重PCR引物濃度優化-10

    3.2.4 MgCl2濃度優化-11

    3.2.5 exTaq 酶優化-11

    3.2.6 dNTPs Mixture優化-12

    3.2.7 10×Ex Taq Buffer優化-12

    3.2.8 退火溫度優化-12

    3.2.9 多重PCR引物間特異性驗證-13

    3.2.10 多重PCR菌間特異性驗證-14

    3.2.11 多重PCR反應檢出限檢測-14

    3.2.12多重PCR方法在生鮮食品中的應用-14

    3.3 結果與分析-14

    3.3.1 引物濃度優化結果-14

    3.3.2 MgCl2濃度優化結果-16

    3.3.3 exTaq 酶優化結果-16

    3.3.4 dNTPs Mixture優化結果-17

    3.3.5 10×PCR Buffer優化結果-17

    3.3.6 退火溫度優化結果-18

    3.3.7 多重PCR引物間特異性結果-19

    3.3.8 多重PCR菌間特異性結果-20

    3.3.9 多重PCR檢出限檢測結果-21

    3.5 實驗總結-24

    參 考 文 獻-25

    致    謝-28

    相關論文資料:
    最新評論
    上傳會員 翩翩起舞 對本文的描述:據報道,全球因食源性致病菌致病的患者多達數億人,每一年大約都有幾億腹瀉病例,致使大概300萬名幼兒死亡,此中由生物源性污染食品所致病例占70%。在發展中國家,每年約有2.7億......
    發表評論 (我們特別支持正能量傳遞,您的參與就是我們最好的動力)
    注冊會員后發表精彩評論獎勵積分,積分可以換金幣,用于下載需要金幣的原創資料。
    您的昵稱: 驗證碼:
    ? 曰批全过程在线看,一 级 黄 色 片免费的,我们娘俩以后可都是你的人了
    <menu id="qosos"><table id="qosos"></table></menu>
  • <rt id="qosos"><u id="qosos"></u></rt>
    <bdo id="qosos"><center id="qosos"></center></bdo>
  • <xmp id="qosos"><table id="qosos"></table>